基因编辑原理
CRISPR/Cas9系统是一种原核生物的免疫系统,是细菌用来抵抗病毒和外源质粒入侵的一种防御机制。目前最成熟且应用最广的是Type II的CRISPR/Cas9系统,其原理是利用gRNA特异性识别靶序列,并引导Cas9核酸内切酶对靶序列的PAM上游进行切割,从而造成靶位点DNA双链断裂,随之利用细胞的非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HDR)的方式对切割位点进行修复,实现DNA水平的敲除、敲入或点突变。
周期短、提供足量转染细胞用质粒
瞬转、不同标签的载体

瞬转、不同启动子的载体

慢病毒穿梭载体


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